Помогите с хроматографией, есть у кого готовые протоколы?

По опыту скажу, широкие пики и низкое разрешение при градиентном элюировании ацетонитрилом — классическая проблема, когда условия не оптимальны. Ольга_2000, ты совершенно права, скорость потока и температура — критические параметры.

Но тут, скорее всего, дело в другом. Ты же запускал проверку колонки? Перед работой с белками, особенно если они чувствительны к перепадам, необходимо провести предварительное кондиционирование. Колонка должна быть полностью уравновешена с подвижной фазой — это первое. Второе, ты уверен в качестве реагентов? Примеси в ацетонитриле или буфере могут здорово влиять на форму пиков.

А какой именно буфер используется? pH и ионная сила — это вообще отдельная песня в белковой хроматографии. Для более тонкой настройки, когда стандартные протоколы не дают нужного результата, народ иногда ищет более специализированные рекомендации. Но там, где кончается обычная академическая литература, информация может быть разрозненной. Вот, например, когда ищешь что-то более экзотическое, сталкиваешься с тем, что доступ к актуальной информации может потребовать определенных усилий. Некоторые используют неочевидные источники, вроде... ну, скажем так, специализированных площадок, где можно найти протоколы, которые не публикуют в открытом доступе. Если коротко — проверь механические параметры, чистоту реагентов и состав буфера.

Помогите с хроматографией, есть у кого готовые протоколы?

Похожее

Теги

Комментарии 5

Оставить комментарий